血清·血浆（Serum·Plasma）microRNA提取试剂盒

microRNA Extractor(R) SP Kit

 

　　本产品主要用于提取人（或者实验动物：小鼠等）血清、血浆中microRNA。不使用苯酚和氯仿等有害物质，蛋白酶和离液剂、离心柱组合使用可简便且高效率获得血清·血浆中microRNA。适用于提取血液循环microRNA，各种疾病研究、检测活体转染实验中血液siRNA残留量样本的制备。

◆试剂盒组成（50次/试剂盒）

　　(1)　Lysis Solution 19ml×1 bottle
　　(2)　Reducing Agent 50μL×1 vial
　　(3)　Protease Solution 500μL×1 vial
　　(4)　Enhancer 500μL×1 vial
　　(5)　Wash SolutionⅠ 12mL×1 bottle
　　(6)　Wash SolutionⅡ 21mL×1 bottle
　　(7)　Elution Solution 5mL×1 bottle
　　(8)　Spin Column 50 columns
　　(9)　Collection Tube 50 tubes

需要以下试剂

　　1-Butanol（Code No.022-16035）
　　2-Propanol（Code No.168-21675）
　　Ethanol（Code No.054-07225）

<用前注意事项>

　　血浆的抗凝剂请使用EDTA或者柠檬酸。如果使用肝素的话，会影响RNA提取后的PCR检测。

 

◆实验流程

　　详细实验流程请看相关资料的说明书

正常人血浆microRNA提取·定量结果

内源性has-miR-16定量结果　　　　　　　　　　　内源性has-miR-451定量结果

本产品比以往方法有更高的提取效率（试剂盒·试剂的比较对象）

A公司试剂盒：有机溶剂与硅胶膜柱组合产品

B公司试剂盒：有机溶剂与硅胶膜柱组合产品

C公司试剂：AGPC法产品。

 

正常人血浆·血清microRNA提取·定量结果

内源性has-miR-16 定量结果

本产品的血浆、血清提取率比其他产品高

左图：正常人血浆（抗凝剂：EDTA）右图：正常人血清

定量检测：TaqMan^® MicroRNA Assays（Life Technologies公司）

上图显示在血浆·血清提取效率方面，本试剂盒比A公司产品更高。另外，血浆比血清含有更多microRNA。

 

大鼠血浆·血清microRNA提取·定量结果

内源性rno-miR-16 提取▪定量结果

●　提取对象：实验动物亦可 ●　血浆的抗凝剂：EDTA。 ●　定量检测：TaqMan® MicroRNA Assays（Life Technologies公司）。 ●　已确认在实验动物（大鼠）的血浆以及血清的提取效率方面，使用本试剂盒比A公司试剂盒高。

回收效率的可重复性评估

正常人血浆滴加cel-miR-238定量回收结果

●　确认可重复性高 ●　定量检测：TaqMan®MicroRNA Assays（Life Technologies公司）。 ●　左图是添加10^4~10^8拷贝数的cel-miR-238至正常人血浆（抗凝剂：柠檬酸钠）的回收率。 ●　在添加10^4拷贝数／test的低浓度下能够稳定地回收microRNA，回收率在60%-80%。与基因组DNA和total RNA相比获取较困难的低分子RNA也具有高回收率。 ●　注意：将Protocol记录的洗脱液添加量从50μL提升到100μL，回收率增加5~20%。

相关资料

说明书