从土壤提取RNA试剂盒

ISOIL for RNA

       

　　ISOIL for RNA适用于从土壤样品提取RNA。可利用磁珠对细胞壁较厚的微生物进行强力的破坏，并利用试剂进行溶菌裂解，从而提取其RNA。RNA提取液添加氟化物，可从非火山灰土壤及火山灰土壤提取RNA。进行纯化时，采取有效去除阻碍酶反应的腐殖质等杂质，可简单地纯化出高纯度RNA。提取到的土壤RNA可用于RT PCR-DGGE分析及RT real-time PCR。

　　本产品是从日本土壤提取RNA的最适合产品，仅需约4小时即可提取大量的高纯度RNA。

　　使用时，需配合磁珠式破碎装置（适用2ml试管）使用。

◆特点

　　•　适用于火山灰土壌(火山灰土等)

　　•　有效提取高纯度RNA

　　•　操作用时仅需约4小时

◆产品内容

ISOIL for RNA （50次用量）

产品	包装	保存	备注
Beads Tube R  （ISOIL  for RNA）	50 瓶	室温	2 ml 容量的试管中含有磁珠。
Sodium Silicofluoride Solution	10 ml x 1	室温	非医疗用剧毒物 氟硅酸钠溶液
Lysis Solution R	1.25 ml x 3	室温
Lysis Solution 20S	25 ml x 1	室温	Lysis Solution   20S有可能析出白色结晶，不影响其品质及性能。如发生此情况，请65°C条件下，对整个容器进行孵化（适当混合），待结晶完全溶解后使用。
Purification Solution R	25 ml x 1	室温	Purification   Solution R有可能析出白色结晶不影响其品质及性能。如发生此情况，请65°C条件下，对整个容器进行孵化（适当混合），待结晶完全溶解后使用。
Precipitation Solution R	35 ml x 1	室温（冷藏）	开封后需冷藏（2～10°C）。Precipitation Solution R较容易发霉，如发现溶液中有浮游物，请停止使用，并购买新的试剂盒。
Ethachinmate	100 μl x 1	室温（冷藏）	开封后需冷藏（2～10°C）。
3M Sodium Acetate（pH5.2）	500 μl x 1	室温
TE（pH8.0）	10 ml x 1	室温
Deoxyribonuclease（RT Grade）	250 units x 1	-20°C
10X DNase（RT Grade）Buffer	1 ml x 1	-20°C
2 mg/ml BSA Solution	1 ml x 1	-20°C

◆使用例子

操作流程

      

　　▶　^*1）～^*17）　注释请参照产品手册。

操作实例 　从英石火山灰土壤提取RNA（电泳结果及RT-PCR）

　　从8种土壤样品提取RNA。 分别使用ISOIL for RNA从0.5g、0.25g的含有英石的火山灰土壤中提取RNA ，配制成溶液（10μl）后，4.7μl用于电泳取样后，0.5g的土壤样品为冷藏（4℃）一周，0.25g的土壤样品为冷藏（4℃）三周。

        

                                 从0.5 g的样品提取RNA溶液

　　▶　一般情况下，可以从土壤中提取RNA，但有些土壤种类难以提取。

　　　　

　　　　　　从0.25 g的样品提取RNA溶液

　　▶　对于难以从0.5g样品提取RNA的土壤，减少样品品量，即可回收更多的RNA。

　　将实验中的0.5g土壤样品RNA溶液作为模板，使用RT-PCR扩增16S rRNA（约 200 base）将获得的PCR产物进行电泳。

　　　　

　　　　　　　　　　　　　　RNA 溶液的RT-PCR

　　Lane 1　东大弥生农场对照区土壌 （英石火山灰土壤、火山灰土壌）

　　Lane 2　东大牧场 牧草地 （英石火山灰土壤、火山灰土壌）
　　Lane 3　筑波 农业环境技术研究所 （英石火山灰土壤、火山灰土壌）
　　Lane 4　东大田无牧草地 （英石火山灰土壤、火山灰土壌）
　　Lane 5　草地试验场常年採草地土壌 （灰色低地土、含有一部分火山灰土壌）
　　Lane 6　千叶农试森林土壌 （英石火山灰土壤、火山灰土壌）
　　Lane 7　兵库农试森林土壌 （褐色森林土、非火山灰土壌）
　　Lane 8　富山县 射水市 片口田土壌 （非火山灰土壌）
　　M　RNA Ladder
　　M11　Marker 11（pUC19/Msp I digest）

　　▶　即使是难以从0.5g样品提取RNA的土壤，也可从RNA 溶液获得RT-PCR产物。

◆备注

　　•　本产品是实验研究试剂。请勿用于医疗及其他用途。

　　•　如果您对试剂的基本的知识不了解，请不要使用。

　　•　Sodium Silicofluoride Solution（氟硅酸钠溶液）为非医疗用剧毒物（苯酚制剂），请小心操作

　　•　使用时请穿着适当的防护设备（手套、眼镜等）。

　　•　请按照说明书进行操作。

　　•　对于因不按照说明书操作而导致的事故，Nippon Gene不负任何责任。

License

　　Nippon Gene 公司正向独立行政法人科学技术振兴机构（JST）申请ISOIL for RNA土壌RNA提取法的专利。土壌RNA的提取法及纯化法已获得JST的认可。

◆资料 Data Sheet

　　产品手册

　　·         ISOIL for RNA 第一版 （PDF 192 KB）

　　SDS(Safety Data Sheet)

　　·         ISOIL for RNA （PDF）

◆相关产品

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Q:　　按照操作流程进行了DNase 处理，RNA 溶液里有DNA残留。

A:　　某些土壤样品难以去除杂质（尤其是英石火山灰土壤），阻碍DNase处理等酶反应。建议使用RNA 提取・纯化试剂盒 ISOGEN II。